MedGlav.com

Medische directory van ziekten

Bloedgroepen. Bepaling van bloedgroep en Rh-factor.

BLOEDGROEPEN.

Talrijke studies hebben aangetoond dat het bloed verschillende eiwitten (agglutinogenen en agglutinines) kan bevatten, waarvan de combinatie (aanwezigheid of afwezigheid) vier bloedgroepen vormt.
Elke groep krijgt een symbool: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
Er is vastgesteld dat alleen bloed van dezelfde groep kan worden getransfundeerd. In uitzonderlijke gevallen, wanneer er geen enkel bloedgroep is en transfusie van vitaal belang is, is transfusie van bloed van een andere groep toegestaan. Onder deze omstandigheden kan bloed van groep 0 (I) worden getransfuseerd aan patiënten met elke bloedgroep en patiënten met bloedgroep AB (IV) kunnen worden getransfundeerd met donorbloed van elke groep..

Voordat met een bloedtransfusie wordt begonnen, is het daarom noodzakelijk om de bloedgroep van de patiënt en de getransfundeerde bloedgroep nauwkeurig vast te stellen..

Bepaling van de bloedgroep.

Om de bloedgroep te bepalen, gebruiken ze standaardsera van de groepen 0 (I), A (II), B (III), die speciaal worden geprepareerd in de laboratoria van bloedtransfusiestations.
Plaats op een witte plaat op een afstand van 3-4 cm, van links naar rechts, de cijfers I, II, III, die standaardserums aanduiden. Een druppel standaard serum 0 (I) -groep wordt met een pipet in de sector van de plaat aangebracht, aangegeven door het cijfer I; vervolgens wordt een druppel serum A (II) groep onder nummer II aangebracht met de tweede pipet; neem ook serum B (III) van groep en breng met een derde pipet onder nummer III aan.

Vervolgens wordt het onderwerp met een vinger geprikt en wordt het stromende bloed met een glazen staaf overgebracht in een druppel serum op de plaat en gemengd tot het gelijkmatig gekleurd is. Op elk serum wordt een nieuwe stick overgebracht. Na 5 minuten vanaf het moment van kleuring (per uur!), Wordt de bloedgroep bepaald door de verandering in het mengsel. In het serum waar agglutinatie optreedt (verlijming van erytrocyten), zijn duidelijk zichtbare rode korrels en klonten; in serum, waar agglutinatie niet optreedt, blijft de bloeddruppel homogeen, gelijkmatig roze gekleurd.

Afhankelijk van de bloedgroep van de proefpersoon zal bij bepaalde monsters agglutinatie optreden. Als de patiënt een bloedgroep van 0 (I) heeft, zal het lijmen van erytrocyten met serum niet optreden.
Als de patiënt een A (II) -bloedgroep heeft, zal er geen agglutinatie zijn met alleen het serum van groep A (II), en als de patiënt een B (III) -groep heeft, zal er geen agglutinatie zijn met serum B (III). Bij alle sera wordt agglutinatie waargenomen als het bloed dat wordt geanalyseerd een AB (IV) -groep is.

Rh-factor.

Soms worden zelfs bij een bloedtransfusie van dezelfde groep ernstige reacties waargenomen. Studies hebben aangetoond dat ongeveer 15% van de mensen een speciaal eiwit in hun bloed mist, de zogenaamde Rh-factor..

Als deze mensen een tweede transfusie van bloed krijgen dat deze factor bevat, treedt een ernstige complicatie op, Rh-conflict genaamd, en zal shock optreden. Daarom moeten momenteel alle patiënten de Rh-factor bepalen, omdat alleen Rh-negatief bloed kan worden getransfuseerd naar een ontvanger met een negatieve Rh-factor.

Een versnelde manier om Rh-affiliatie te bepalen. Op een glazen petrischaal worden 5 druppels anti-rhesus serum van dezelfde groep als die van de ontvanger aangebracht. Een druppel bloed van de patiënt wordt aan het serum toegevoegd en grondig gemengd. De petrischaal wordt in een waterbad van 42-45 ° C geplaatst. De reactieresultaten worden na 10 minuten geëvalueerd. Als bloedagglutinatie optreedt, heeft de patiënt Rh-positief bloed (Rh +); als er geen agglutinatie is, is het geteste bloed Rh-negatief (Rh-).
Er is een aantal andere methoden ontwikkeld om de Rh-factor te bepalen, met name met behulp van het universele anti-Rh-reagens D.

Het is verplicht om de bloedgroep en Rh-behorende bij alle patiënten in het ziekenhuis te bepalen. De resultaten van het onderzoek moeten worden ingevoerd in het paspoort van de patiënt.

Bepaling van Rh-factor en bloedgroep

Het concept van bloedgroep

Een bloedgroep is een specifieke set antigenen en antilichamen

Een bloedgroep weerspiegelt de aan- of afwezigheid van een bepaalde set antigenen en antilichamen. Antigenen bevinden zich op het oppervlak van bloedcellen - erytrocyten, antilichamen zijn aanwezig in bloedplasma.

De ontdekking van de karakteristieke kenmerken van bloed is van Karl Landsteiner. Een Oostenrijkse arts probeert al jaren de oorzaak van ernstige complicaties bij sommige patiënten na bloedtransfusie vast te stellen. Uiteindelijk slaagde hij erin de essentie te begrijpen door middel van een experiment: op het voorbeeld van 6 bloedmonsters onthulde de wetenschapper de fysiologische reactie van erytrocyten met verschillende bloedserums. Het bleek dat de gevormde elementen aan elkaar kleven met antilichamen uit de sera van andere mensen en er treedt agglutinatie op. Klonteren wordt niet gevormd door de erytrocyten zelf, maar door de antigenen die zich erop bevinden.

Dankzij Landsteiner begon de geneeskunde over bloedgroepen te praten

Het antigeen wordt agglutinogeen genoemd, antilichamen tegen het antigeen worden agglutinines genoemd. Volgens het principe van het binden van agglutinogenen met bepaalde agglutinines, identificeerde Landsteiner 3 bloedgroepen. Een van hen onderscheidde zich door het feit dat adhesie van erytrocyten niet optrad wanneer serum werd toegevoegd, dat wil zeggen dat er geen antigenen in zaten. Hiervoor kreeg ze de aanduiding 0 (nul), de andere twee door de aanwezigheid van antigenen A en B. Zo werd in 1900 het AB0 bloedgroepsysteem opgericht. Enkele jaren later identificeerden de studenten van Landsteiner de 4e bloedgroep, die, in tegenstelling tot de vorige groepen, twee antigenen tegelijk had - A en B.

Tegenwoordig zijn er 36 systemen van bloedgroeperingen, maar in de medische praktijk is het AB0-systeem nog steeds het meest wijdverbreid en belangrijk, evenals de Rh-factor, die later ook met de hulp van Landsteiner werd ontdekt..

Welke bloedgroepen bestaan ​​er volgens het AB0-systeem

ABO-bloedgroepen

Het AB0-systeem heeft 4 bloedgroepen:

• 0 (I) - geen antigenen;
• A (II) - antigeen A;
• B (III) - antigeen B;
• AB (IV) - antigenen A en B.

Een antigeen is een oligosaccharideketen die is geassocieerd met membraaneiwitten en erytrocytlipiden. Antigenen A en B verschillen alleen van elkaar door een verschillende terminale rest van het oligosaccharide.

De voorloper van antigenen A en B is antigeen H, dat op alle erytrocyten aanwezig is. Door overerving ontvangt het kind genen van de vader en moeder die de moleculaire structuur van toekomstige antigenen coderen. Gen A codeert voor een enzym dat antigeen A vormt uit een deel van antigenen H, gen B draagt ​​bij aan de vorming van antigeen B met behulp van antigeen H.In bloedgroep 0 (I) bevindt zich gen H en dienovereenkomstig antigeen H, maar het heeft niets te binden, aangezien genen A en B zijn afwezig.

Korte kenmerken van de vier bloedgroepen

Groepsincompatibiliteit leidt tot het "plakken" van erytrocyten

In elk van de groepen zijn naast antigenen antilichamen aanwezig. Wanneer verschillende bloedgroepen worden gecombineerd, beginnen antilichamen te interageren met antigenen, aan elkaar te kleven, ze vernietigen erytrocyten, wat tot ernstige gevolgen leidt, waaronder de dood. Elke bloedgroep onderscheidt zich door de aanwezigheid van antilichamen tegen andere groepen, met uitzondering van AB.

• Groep 0 wordt gekenmerkt door antilichamen α en β, dat wil zeggen dat de eigenaren van deze groep geen bloed kunnen nemen van A, B of AB.
• Groep A bevat β-agglutinines, wat onverenigbaarheid betekent met groep B en AB, maar het is mogelijk om bloed af te nemen uit groep 0.
• Groep B verschilt in antilichamen α, is niet compatibel met A- en AB-groepen, donoren met groep 0 zijn geschikt.
• De AB-groep kan geen antilichamen tegen deze antigenen hebben, aangezien agglutinogenen en agglutinines niet naast elkaar kunnen bestaan ​​in één organisme, dus alle groepen zijn geschikt voor AB-eigenaren.

Groep 0 kan dus een universele donor zijn en AB-groep kan een universele ontvanger zijn. Maar op dit moment hebben ze de praktijk van transfusie van verschillende groepen verlaten, transfusie wordt uitgevoerd door donoren van dezelfde bloedgroep om negatieve gevolgen te voorkomen..

Elk van de groepen kan worden onderverdeeld in subgroepen, antigeen A omvat bijvoorbeeld antigenen Al, A2, A3, enz., Antigeen B bevat ook verschillende varianten van subgroepen. Meestal kunnen subgroepen belangrijk zijn bij het bepalen van de bloedgroep. Om de mogelijke invloed van variatie van antigeensubgroepen te vermijden, wordt voorafgaand aan transfusies een test uitgevoerd op individuele compatibiliteit.

Rh-factor: negatief en positief

Bloedgroepen kunnen Rh-negatief of Rh-positief zijn

Samen met AB0 is het rhesus (Rh) -systeem van groot belang. Het verschil in resusgroepen werd onthuld in de jaren 40 van de twintigste eeuw, toen artsen werden geconfronteerd met agglutinatie van het serum van de patiënt met 3⁄4 van de rode bloedcelmonsters van donoren, hoewel er bij sommige monsters een volledig samenvallen van AB0-bloedgroepen was. Later, onder leiding van K. Landsteiner, ontdekte en beschreef Dr. A. Wiener dezelfde reactie die werd verkregen met het bloedserum van een resusaap, waarvan de naam.

Rh is een eiwit uit een groep antigenen die op het oppervlak van erytrocyten worden aangetroffen. Van de verschillende antigenen waaruit het rhesussysteem bestaat, is antigeen D overheersend. Daarom is het zijn aanwezigheid die een positieve Rh (Rh +) bepaalt, het ontbreken ervan betekent dat de bloedfactor negatief is (Rh -).

Wanneer Rh-positieve bloedcellen de bloedsomloop binnenkomen met Rh-negatieve erytrocyten, worden allo-immuun antilichamen gevormd. Het lichaam neemt antigeen D als vreemd waar en probeert er vanaf te komen. Dit fenomeen wordt Rh-conflict genoemd. De ontdekking van het Rh-systeem maakte het mogelijk om de negatieve gevolgen van transfusie te vermijden, en om een ​​manier te vinden om zwangere vrouwen te helpen met een Rh-conflict met de foetus in de aanwezigheid van verschillende Rh-factoren.

Rh wordt overgeërfd in een recessief-dominant patroon, waarbij (Rh -) recessief is en (Rh +) dominant is.

Bepaling van de bloedgroep

Bepaling van groepsverband door de agglutinatiemethode

De bloedgroep wordt gedetecteerd met behulp van de agglutinatiereactie. De erytrocyten worden gecombineerd met een zoutoplossing van monoklonale antilichamen, die elk de agglutinines α, β, α en β bevatten. De lijmreactie met bepaalde antilichamen onthult de overeenkomstige groep.

Groep A - vormige elementen gecombineerd met agglutinines α.

Groep B - adhesie vond plaats in een oplossing met antilichamen β.

Groep AB - het agglutinatieproces werd met geen van de antilichamen waargenomen.

Groep 0 - erytrocyten hielden zich aan antilichamen van elke oplossing.

Bepaling van de Rh-factor

Bepaling van Rh-affiliatie van bloed

Er worden verschillende methoden gebruikt om Rh-toebehoren te identificeren, de meest voorkomende zijn tests op basis van de interactie van erytrocyten met anti-Rhesus-serum in verschillende oplossingen. Het controlemonster is meestal anti-rhesus-serum van de IV-bloedgroep, dat wil zeggen, het bevat geen antigeen D, antigenen A en B.Als een karakteristieke agglutinatiereactie optreedt, wordt Rh als positief bepaald.

Kan het onderzoek een vals resultaat opleveren?

Overtreding van de proceduretechniek kan tot een testfout leiden

De test kan in de volgende gevallen een vertekend resultaat weergeven:

1. Overtreding van de analysetechniek:
   • Onjuiste temperatuur.
   • Onjuiste verhouding tussen agglutinines en erytrocyten.
   • Onvoldoende observatietijd.
   • Fout in de volgorde van de reagentia op de plaat.
   • Reagentia van slechte kwaliteit.
2. Moeilijke bloedgroepen en Rh-factor.
   • Als het antigeen op erytrocyten bijvoorbeeld een laag agglutinatievermogen heeft, wordt antigeen A weergegeven door de A2-subgroep.
   • Met niet-specifieke adhesie van gevormde elementen, wat een gevolg kan zijn van auto-immuunpathologieën.
   • Bloedchimeren dragen bij aan de vervorming van het resultaat. Dit is een aandoening wanneer rode bloedcellen in verschillende populaties aanwezig zijn en antigenen tot verschillende groepen behoren. Kan optreden als gevolg van massale transfusies van donoren van groep 0 (I), na transplantatie, maar wordt meestal waargenomen bij heterozygote tweelingen.
   • Verschillende ziekten beïnvloeden het agglutinatievermogen van erytrocyten.
   • Soms zijn bij pasgeborenen agglutinogenen zwak, zijn antilichamen afwezig.

Kan de bloedgroep veranderen??

Bloedgroep is een onderwerp dat niet volledig onder de wetenschap valt

Vroeger was er een duidelijk antwoord op deze vraag "nee". Als een andere groep of factor werd geregistreerd, werden de resultaten alleen toegeschreven aan laboratoriumfouten. Tegenwoordig, wanneer apparatuur en reagentia worden verbeterd, wordt de kans op fouten kleiner..

Wetenschappers raakten geïnteresseerd in deze kwestie en begonnen theorieën te ontwikkelen die het idee van bloeddifferentiatie door groepen veranderen. Een ervan raakte wijdverspreid: het menselijk ras vertegenwoordigt aanvankelijk totaal verschillende soorten die voorheen afzonderlijk leefden, zonder met elkaar te vermengen, elke soort had zijn eigen set genen.

Toen mensen zich geografisch begonnen te verplaatsen en paren begonnen te creëren, was het bloed van volgende generaties al gemengd, met een mestizo-genoom. Het immuunsysteem begon antilichamen te produceren tegen antigenen die het niet kende. Dit is hoe bloedgroepen werden gevormd. Omdat moderne mensen in feite mestizo zijn, hebben ze allerlei combinaties van antigenen, die onder invloed van verschillende factoren (infectie, zwangerschap) kunnen worden geactiveerd, wat zich manifesteert als gevolg van een verandering in de bloedgroep. In feite manifesteert het mestizo-multigeen van het mestizo-genoom eenvoudig zijn andere "kanten", dat wil zeggen dat het aanvankelijk verschillende antigenen bevat, die in de ene levensperiode door sommige antigenen worden gemanifesteerd, in een andere door andere..

De belangstelling voor het ontstaan ​​van bloedgroepen vervaagt niet. Onlangs werden 2 nieuwe bloedgroepen geïdentificeerd door wetenschappers uit Vermont, er wordt aangenomen dat er nog minstens 10 groepen zijn die nog niet zijn herkend.

Bepaling van de bloedgroep

Bepaling van de bloedgroep is een procedure waarbij antigenen worden geanalyseerd - eiwitten die erytrocyten vormen, rode bloedcellen. Er zijn verschillende soorten antigenen en antilichamen die door hen worden geproduceerd, op basis waarvan elke persoon, afhankelijk van de samenstelling van zijn erytrocyten, kan worden toegewezen aan een bepaalde bloedgroep.

U kunt bloedgroep- en Rh-factortests ondergaan op de Otradnoye Polyclinic. De analyseresultaten zijn binnen één dag klaar. Als u geen tijd heeft om naar de kliniek te komen, kunt u bloed doneren voor onderzoek aan huis: er komt een verpleegkundige bij u langs.

Het hebben van gegevens over uw eigen bloedgroep in een kritieke situatie, wanneer de telling voor minuten duurt, kan iemands leven redden. Als dergelijke informatie ontbreekt, zullen artsen vóór een bloedtransfusie extra tijd aan onderzoek moeten besteden. Daarom wordt elke patiënt aangeraden om een ​​bloedgroeptest te doen en altijd een afdruk van de testresultaten bij zich te hebben: bijvoorbeeld in een portemonnee, naast andere belangrijke documenten.

Bepaling van bloedgroep en Rh-factor

Er zijn nu meer dan 30 verschillende benaderingen om bloedgroepen te bepalen. Afhankelijk van het gebruikte systeem kan het aantal bloedgroepen verschillen: de Kell-, Kid- en Duffy-systemen wijzen er 3 toe en de MNS'en - 9. Toch zijn de meest voorkomende twee systemen:

1. AB0 (A, B, nul);
2. Rh-factor.

Het AB0-systeem onderscheidt 4 bloedgroepen en impliceert de studie van 3 soorten antigenen - A, B en H. In de testresultaten is het echter gebruikelijk om H te vervangen door 0 (wat aangeeft dat er geen antigenen A en B in erytrocyten aanwezig zijn). Letters worden aangevuld met cijfers - I, II, III of IV. Dat is de reden waarom de patiënten zelf vaak over hun bloedgroep praten, niet in letter, maar in numerieke aanduiding - de eerste, tweede, derde of vierde. Bij de analyse wordt niet alleen rekening gehouden met de aan- / afwezigheid van antigenen in erytrocyten, maar ook met de aanwezigheid van agglutinines in het bloedplasma. Dit zijn specifieke eiwitten, antilichamen die "vreemde" erytrocyten aanvallen. Als een patiënt een transfusie krijgt met bloed van een groep met ongeschikte antigenen, zullen agglutinines de erytrocyten die ze bevatten vernietigen.

Volgens het AB0-systeem worden de volgende bloedgroepen onderscheiden:

• 0 (I) - antigenen A en B zijn afwezig, antilichamen α en β worden gedetecteerd.
• A (II) - antigeen A en antilichaam β zijn aanwezig.
• B (III) - antigeen B en antilichaam α aanwezig.
• AB (IV) - antigenen A en B gedetecteerd, geen antilichamen.

Het Rh-systeem (Rh-factor) omvat de analyse van antigeen D - een specifiek bloedeiwit dat aanwezig of afwezig is op het oppervlak van rode bloedcellen. Rh-factor zal positief zijn (aangeduid als Rh +) als antigeen aanwezig is. Bij afwezigheid van dit eiwit is het negatief (Rh-).

De Rh-factor is alleen van belang in 2 situaties:

• Met bloedtransfusie. Als bloed met een andere Rh-factor het lichaam van de patiënt binnendringt, kan een Rh-conflict optreden. Dit kan leiden tot bloedtransfusieschokken - een zeldzame maar ernstige complicatie die tot uiting komt in een aanzienlijke verslechtering van het welzijn van de patiënt, een verlaging van de bloeddruk en ademhalingsmoeilijkheden. Soms is er een schending van de functies van het hart, de lever of de nieren, wat fataal kan zijn. Rh-negatieve mensen ontvangen bloedtransfusies uitsluitend met Rh-negatief. Patiënten met een positieve Rh-factor in afwezigheid van een alternatief kunnen worden getransfundeerd tot 500 ml Rh-negatief bloed.
• Bij het plannen van een zwangerschap. Als de moeder Rh-negatief heeft en de vader positief is en het kind de mannelijke Rh-factor heeft geërfd, kan het Rh-conflict zich tijdens de zwangerschap ontwikkelen. Het lichaam van de moeder begint de foetus als een "vreemd lichaam" waar te nemen en valt de erytrocyten aan. Als gevolg hiervan ervaart het kind zuurstofgebrek en kan er ook een spontane abortus optreden. Artsen kunnen deze gevolgen voorkomen en zorgen voor een normaal verloop van de zwangerschap en de geboorte van een gezonde baby. Maar hiervoor is het van tevoren (bij voorkeur zelfs vóór de conceptie) nodig om de Rh-factoren van potentiële moeder en vader te kennen. Met een positieve Rh heeft de moeder geen risico op Rh-conflict, ongeacht de Rh-factor van de vader.

Bij het bepalen van een bloedgroep worden meestal beide systemen gebruikt: ABO en Rh.

Indicaties voor onderzoek

Een analyse om de bloedgroep te bepalen, wordt uitgevoerd:

• Op verzoek van de patiënt (als hij voor het geval dat hij zijn bloedgroep wil weten).
• Voor electieve operaties met bloedverlies.
• Voor mensen wier activiteiten gepaard gaan met een risico op ernstig letsel (bijvoorbeeld militairen, reddingswerkers, brandweerlieden).
• Bij het plannen van een zwangerschap - om Rh-conflict te voorkomen.
• Maandelijks tijdens de zwangerschap (na 32 weken vaker), als eerder werd ontdekt dat de vrouw een negatieve Rh heeft en de man een positieve. Als er afwijkingen worden geconstateerd, wordt een behandeling voorgeschreven.
• Voor een pasgeboren kind, als zijn moeder een negatieve Rh-factor heeft en zijn vader positief is, zelfs als er geen problemen waren tijdens de zwangerschap.

Als de baby een positieve Rh heeft voor de preventie van Rh-conflict tijdens de daaropvolgende zwangerschap, wordt de vrouw geïnjecteerd met anti-Rh-immunoglobuline in de eerste drie dagen na de bevalling..

• Voor een pasgeborene met tekenen van hemolytische ziekte - een aandoening die wordt veroorzaakt door de onverenigbaarheid van Rh tussen de moeder en het kind. De symptomen van pathologie zijn geelzucht, bloedarmoede, oedeem. Hemolytische ziekte wordt zelfs in de prenatale periode gedetecteerd.

Belangrijk! Rh-conflict komt zelden voor tijdens de eerste zwangerschap, meestal tijdens volgende zwangerschappen. Dit komt door het feit dat het immuunsysteem van de vrouw voor het eerst een 'vreemd' antigeen tegenkomt en geen tijd heeft om krachtig te reageren, maar 'zich de dreiging herinnert'. De volgende keer zal ze veel agressiever reageren. De bepaling van de bloedgroep en Rh-factor moet echter vóór de eerste zwangerschap worden uitgevoerd. De introductie van een antirhesusmedicijn na de eerste bevalling voorkomt complicaties bij volgende zwangerschappen.

In de volgende gevallen is een dringende bloedgroepbepaling vóór een bloedtransfusie vereist:

• met ernstige bloedarmoede;
• met bloeding (baarmoeder, gastro-intestinaal, pulmonaal);
• met ongeplande chirurgische ingrepen;
• voor ernstig letsel door verlies van grote hoeveelheden bloed.

Voorbereiding op onderzoek

Er zijn geen specifieke voorbereidingen vereist. Het wordt echter aanbevolen om niet later dan 4 uur voor de bloedafname voedsel in te nemen. Ook moet aan de vooravond van de procedure overmatige fysieke activiteit worden uitgesloten. Het is beter om van tevoren naar de kliniek te komen en 10-15 minuten rustig te zitten voordat u bloed doneert.

Aangezien de resultaten van het onderzoek kunnen worden beïnvloed door bepaalde ziekten, het nemen van een aantal medicijnen, voedingsgewoonten en zelfs de emotionele toestand van de patiënt, wordt aanbevolen de analyse twee keer uit te voeren om onbetrouwbare resultaten te voorkomen. Een lijst met alle ingenomen medicijnen moet van tevoren aan de arts worden verstrekt..

Methoden voor het bepalen van de bloedgroep

Momenteel zijn er 3 hoofdmethoden voor het bepalen van de bloedgroep, die overeenkomen met het AB0-systeem:

• Bepaling van de bloedgroep met standaard sera.
• Kruisreactiemethode.
• Bepaling van de bloedgroep met tsoliclones.

Bloed voor testen wordt meestal uit een ader genomen, soms uit een vinger.

Standaard methode

Bepaling van de bloedgroep met behulp van standaardsera is de eenvoudigste en meest gebruikelijke methode. De gebruikte sera komen overeen met 4 bloedgroepen en zijn in verschillende kleuren gekleurd:

• kleurloos - groepen 0 (I);
• blauw (lichtblauw) - groepen A (II);
• rood (roze) - groepen B (III);
• geel - groepen AB (IV).

Referentie. Isohemagglutinerende sera worden gemaakt van donorbloed. Ze zijn houdbaar en moeten worden bewaard bij 4-8 ° C. Serums worden in batches geproduceerd, het batchnummer staat op de ampul. Neem voor analyse twee sera van elke groep uit verschillende batches. Hierdoor kunt u fouten in de onderzoeksresultaten elimineren..

Bepaling van bloedgroep - algoritme:

1. Serumdruppels worden op een speciale plaat of glas aangebracht
2. Vervolgens wordt het bloed van de patiënt aan elke druppel toegevoegd.
3. De plaat wordt zachtjes geschud zodat het serum wordt gecombineerd met het bloed..
4. Controleer na 5 minuten of er een agglutinatiereactie ("kleven" van erytrocyten) is opgetreden: zo ja, dan worden er korrels of vlokken in het monster gevormd.

• Bij afwezigheid van een agglutinatiereactie in alle monsters, is de bloedgroep van de patiënt 0 (I).
• De afwezigheid van een agglutinatiereactie in het monster met serum van groep II, in alle andere gevallen trad agglutinatie op - groep A (II).
• Afwezigheid van agglutinatie in een druppel serumgroep III - de patiënt heeft bloedgroep B (III).
• Bij alle monsters trad een agglutinatiereactie op - bloedgroep AB (IV).

Kruisreactiemethode

De studie omvat twee analyses: met standaardsera en met standaard erytrocyten. Voor de procedure met rode bloedcellen wordt het bloedserum van de patiënt gebruikt. Het wordt verkregen door het biomateriaal te centrifugeren. Serum wordt blootgesteld aan standaard erytrocyten.

Referentie. Standaard erytrocyten worden verkregen uit gedoneerd bloed uit de groepen 0, A en B. Voor analyse worden 2 monsters genomen van dezelfde erytrocyten uit verschillende series.

Druppels bloedserum van de patiënt worden op de plaat aangebracht en daarnaast zijn druppels standaard erytrocyten. Schud de plaat om de materialen te mengen. Vervolgens worden de resultaten geëvalueerd:

• Als agglutinatie is opgetreden met erytrocyten van groep A en B - bloedgroep 0 van de patiënt.
• In aanwezigheid van agglutinatie met erytrocyten van groep B - bloedgroep A.
• Agglutinatie met erytrocyten van groep A - bloedgroep B.
• Bij afwezigheid van agglutinatie in alle monsters - bloedgroep AB.

Parallel aan dit onderzoek wordt een analyse uitgevoerd met een standaardmethode, waarna de resultaten worden vergeleken.

Bepaling van de bloedgroep met tsoliclones

Bepaling van de bloedgroep met behulp van tsoliclones gebeurt op dezelfde manier als met de standaardmethode. De resultaten worden op dezelfde manier geëvalueerd. Het enige verschil is dat in plaats van standaardsera, anti-A- en anti-B-tsoliconen worden gebruikt - dit zijn synthetische sera die kunstmatige agglutinines α en β bevatten.

Bepaling van de Rh-factor

De Rh-factor kan worden bepaald met behulp van:

• anti-resus serum (expresmethode);
• tsoliclone anti-D super.

Voor onderzoek met standaard anti-rhesus serum kan het bloed of de daaruit verkregen erytrocyten van de patiënt worden gebruikt. Een standaard anti-resus serum wordt in een reageerbuis gedruppeld, waarna een druppel bloed of erytrocyten van de patiënt wordt geïnjecteerd. De buis wordt met de hand rondgedraaid om het bloed met het serum te mengen. Er wordt ook een beetje zoutoplossing aan de reageerbuis toegevoegd. De resultaten worden beoordeeld op de aan- / afwezigheid van agglutinatie:

• Aanwezig - Rh positief.
• Afwezig - Rh negatief.

De analyse met anti-D super zoliclon wordt uitgevoerd op een plaat. Er wordt een reagens op aangebracht, er wordt een druppel bloed naast geplaatst. De plaat wordt geschud om de materialen bij elkaar te brengen. Vervolgens wordt, net als bij de vorige methode, de aanwezigheid of afwezigheid van een agglutinatiereactie beoordeeld.

Rh-factor: negatief en positief

Ongeveer 85% van alle bewoners van de planeet heeft een positieve Rh-factor. De aan- of afwezigheid van antigeen D heeft geen invloed op het welzijn en de gezondheid van de patiënt.

Regels voor het decoderen van resultaten

De analyseresultaten worden in de volgende vorm aan de patiënt verstrekt:

• bloedgroep (0, A, B, AB);
• Rh-factor: Rh + (positief) of Rh- (negatief).

De resultaten van de bloedgroeponderzoek zullen gedurende het hele leven relevant zijn. Als het onderzoek al is uitgevoerd, hoeft het niet te worden herhaald. De bloedgroep is een "constante waarde" en een genetisch overgeërfde eigenschap, dat wil zeggen dat deze tijdens het leven niet verandert. Hoewel ooit een jonge Australische Demi Lee-Brennan haar bloedgroep veranderde na een levertransplantatie. Maar dit geval is een uitzondering en artsen konden dit fenomeen niet eenduidig ​​verklaren..

Soms beweren sommige patiënten dat hun bloedgroep is veranderd als gevolg van een ziekte of tijdens de zwangerschap. Dit kan worden toegeschreven aan een medische fout. Zowel zwangerschap als sommige pathologieën kunnen het moeilijk maken om de testresultaten te ontcijferen, waardoor ze onbetrouwbaar kunnen blijken te zijn. Er zijn gevallen dat er een fout is gemaakt tijdens een eerdere bloedtest.

Methoden voor het bepalen van de bloedgroep

In de moderne geneeskunde kenmerkt een bloedgroep een reeks antigenen die zich op het oppervlak van erytrocyten bevinden en die hun specificiteit bepalen..

Er is een enorm aantal van dergelijke antigenen (meestal wordt een tabel met bloedgroepen met verschillende antigenen gebruikt), maar de bepaling van de bloedgroep wordt overal uitgevoerd met behulp van de classificatie volgens de Rh-factor en het AB0-systeem.

Het bepalen van de groep is een verplichte procedure ter voorbereiding op elke operatie. Een dergelijke analyse is ook nodig wanneer u zich aansluit bij sommige contingenten, waaronder het leger, medewerkers van interne organen en wetshandhavingsinstanties. Deze activiteit wordt onderbroken vanwege het verhoogde risico op een levensbedreigende aandoening om de tijd die nodig is om hulp te verlenen in de vorm van bloedtransfusies te verkorten.

Bloedsamenstelling van verschillende bloedgroepen

De essentie van het AB0-systeem is de aanwezigheid van antigeenstructuren op erytrocyten. Er zijn geen typische antilichamen (gammaglobulinen) die daarmee overeenkomen in plasma. Daarom kunt u voor bloedonderzoek de reactie "antigeen + antilichaam" gebruiken.

Erytrocyten kleven aan elkaar wanneer antigeen en antilichaam elkaar ontmoeten. Deze reactie wordt hemagglutinatie genoemd. De reactie wordt bij analyse weergegeven als kleine vlokken. De studie is gebaseerd op het verkrijgen van een beeld van agglutinatie met sera.

Antigenen van erytrocyten "A" binden respectievelijk aan antilichamen "ά" en ook "B" aan "β".

De volgende bloedgroepen onderscheiden zich naar samenstelling:

• I (0) - ά, β - het oppervlak van erytrocyten bevat helemaal geen antigenen,
• II (A) - β - er is antigeen A en antilichaam β op het oppervlak,
• III (B) - ά - oppervlak bevat B met type antilichaam антит,
• IV (AB) - 00 - het oppervlak bevat beide antigenen, maar heeft geen antilichamen.

Bepaling van bloedgroepen

Het embryo heeft al antigenen in de toestand van het embryo en agglutinines (antilichamen) verschijnen in de eerste levensmaand.

Bepalingsmethoden

Standaard methode

Er zijn veel technieken, maar het laboratorium gebruikt routinematig standaard sera-bepaling.

De standaard sera-methode wordt gebruikt om de typen AB0-antigenen te bepalen. De samenstelling van het standaard isohemagglutinerende serum bevat een reeks antilichamen tegen erytrocytmoleculen. In het geval van de aanwezigheid van een antigeen dat gevoelig is voor de werking van antilichamen, wordt een antigeen-antilichaamcomplex gevormd dat een cascade van immuunreacties op gang brengt.

Het resultaat van deze reactie is de agglutinatie van erytrocyten, op basis van de aard van de agglutinatie die optreedt, is het mogelijk om te bepalen of het monster tot een willekeurige groep behoort.

Voor de bereiding van standaardserum worden donorbloed en een specifiek systeem gebruikt - door plasma, inclusief antilichamen, te isoleren en vervolgens te verdunnen. Verdunning wordt uitgevoerd met een isotone natriumchloride-oplossing.

Het fokken gebeurt als volgt:

• Voeg 1 milliliter plasma toe aan een reageerbuis met 1 ml van een 0,9% oplossing van eetbaar zout. Meng de oplossing grondig.
• Vervolgens wordt de resulterende plasma-oplossing ingenomen met een pipet in een volume van 1 milliliter. Voeg het toe aan een reageerbuis die een isotone oplossing bevat. Het is dus noodzakelijk om een ​​plasmaverdunning te bereiken met een verhouding van 1 op 256. Het gebruik van andere verdunningen brengt het risico van een diagnostische fout met zich mee.

Het onderzoek zelf wordt op deze manier uitgevoerd:

• Een druppel van elk serum (met een totaal volume van ongeveer 0,1 milliliter) wordt op een speciale plaat geplaatst op het gebied waar een overeenkomstig merkteken is (2 monsters worden gebruikt, een daarvan is een controle, de tweede is voor onderzoek).
• Vervolgens wordt naast elke druppel serum een ​​testmonster geplaatst in een volume van 0,01 milliliter, waarna het afzonderlijk wordt gemengd met elk diagnosticum..

Regels voor het decoderen van resultaten

Na vijf minuten kunt u de testresultaten evalueren. In grote druppels serum treedt verlichting op, in sommige is er een agglutinatiereactie (kleine vlokken worden gevormd), in andere niet.

Video: bepaling van bloedgroep en Rh-factor

Hier zijn de mogelijkheden:

• Als er in beide monsters geen agglutinatiereactie is met sera II en III (+ controle 1 en IV) - bepaling van de eerste groep,
• Als stolling wordt waargenomen in alle monsters, behalve II - bepaling van de tweede,
• Bij afwezigheid van een agglutinatiereactie alleen in een monster uit groep III - definitie III,
• Als stolling wordt waargenomen in alle monsters, inclusief de IV-controle - definitie IV.

Als de sera in de juiste volgorde staan ​​en er handtekeningen op de plaat staan, is het gemakkelijk navigeren: de groep komt overeen met plaatsen zonder agglutinatie.

In sommige gevallen is de hechting niet duidelijk zichtbaar. Vervolgens moet de analyse opnieuw worden uitgevoerd, kleine agglutinatie wordt onder een microscoop waargenomen.

Kruisreactiemethode

De essentie van deze techniek is de bepaling van agglutinogenen met behulp van standaard sera of tsoliclones met parallelle bepaling van agglutinines met behulp van standaard erytrocyten.

De transversale analysetechniek verschilt praktisch niet van de studie met sera, maar er zijn enkele toevoegingen.

Voeg druppel voor druppel standaard erytrocyten toe aan de plaat onder de sera. Vervolgens wordt uit de reageerbuis met het bloed van de patiënt door de centrifuge gevoerd, het plasma geëxtraheerd met een pipet, die wordt geplaatst op de standaard erytrocyten onderaan - toegevoegd aan het standaardserum.

Evenals volgens de techniek van de standaardmethode, worden de resultaten van het onderzoek enkele minuten na het begin van de reactie geëvalueerd. In het geval van een agglutinatiereactie kunnen we spreken over de aanwezigheid van agglutinines AB0, in het geval van een plasmareactie kunnen we oordelen over agglutinogenen.

Resultaten van bloedonderzoek met standaard erytrocyten en sera:

Geen reactie.

De crossover-methode heeft aan populariteit gewonnen vanwege het feit dat het diagnostische fouten voorkomt die optreden bij het gebruik van standaardtechnieken.

Bepaling van de bloedgroep met tsoliclones

Tsoliklons zijn synthetische serumvervangers die kunstmatige vervangers voor agglutinines van het type ά en β bevatten. Ze worden erythrotests "Tsoliklon anti-A" genoemd (hebben een roze kleur), evenals "anti-B" (hebben een blauwe kleur). De verwachte agglutinatie wordt waargenomen tussen de agglutinines van tsoliclones en rode bloedcellen..

Deze techniek vereist geen twee series, het is betrouwbaarder en nauwkeuriger. Onderzoek en evaluatie van de resultaten worden op dezelfde manier uitgevoerd als bij de standaardmethode..

Groep IV (AB) wordt noodzakelijkerwijs bevestigd door agglutinatie met tsoliklon "anti-AB", evenals de afwezigheid van erytrocytenhechting in isotone natriumchloride-oplossing.

Express-methode met behulp van een set "Erythrotest-groepskaarten"

Hoewel de algemeen aanvaarde methoden om vast te stellen of bloed tot een bepaalde groep behoort, wijdverspreid zijn, worden in de moderne geneeskunde snelle methoden geïntroduceerd, waarvan de meest gebruikelijke "Erythrotest" is..

Bij het bepalen van een groep met behulp van de "Erythrotest group cards" -methode, is een set instrumenten vereist, waaronder de volgende apparaten:

• Een plaat met vijf gaten voor het maken van een groepsbepaling door zijn Rh-aansluiting en AB0-systeem,
• Scarifier ontworpen om een ​​monster te verkrijgen dat nodig is voor onderzoek,
• Glazen staafjes voor het mengen van monsters,
• Schone pipet voor het verzamelen van oplossingen.

Alle genoemde tools zijn nodig voor een foutloze diagnose.

Met de set voor de analyse van bloed "Erythrotest-groepskaarten" kunt u de Rh-factor bestuderen en de bloedgroep bepalen onder alle omstandigheden, het is vooral effectief bij afwezigheid van de mogelijkheid om conventionele methoden te gebruiken.

In de putjes op de plaat bevinden zich tsoliclonen voor antigenen (dit zijn anti-A, -B, -AB tsoliclonen) en voor het belangrijkste antigeen, dat de overerving van de Rh-factor veroorzaakt (dit is een anti-D-tsoliclon). Het vijfde gaatje bevat een controlereagens waarmee u mogelijke fouten kunt voorkomen en correct kunt bepalen of u bij de bloedgroep hoort.

Bepaling van bloedgroep en Rh-factor

Bepaling van de bloedgroep en Rh-factor zijn op twee manieren verdeeld:

1. primaire bepaling van bloedgroep en Rh-factor (anti-A-, Anti-B- en Anti-D-coliclonen)
2. secundaire diagnose van bloedgroep en Rh-factor (standaard sera en kruismethode, bepaling van het fenotype, d.w.z. antigenen C, c, E, e, C w, K, k)

Express diagnostiek (primaire bepaling van de bloedgroep en Rh-factor) houdt geen rekening met Kell-antigenen, om nog maar te zwijgen van andere verificatiesystemen. Daarom worden tsoliclones alleen gebruikt voor de primaire bepaling van de bloedgroep en Rh-factor en voor noodindicaties van transfusie van bloedbestanddelen.

Meer informatie over de zeldzaamste bloedgroep ter wereld vind je hier.

Bepaling van bloedgroep en Rh-factor door anti-A-, anti-B- en Anti-D-tsolikonen volgens het AB0-systeem en het Rh-systeem

Bepaling van de bloedgroep en Rh-factor met anti-A, anti-B en Anti-D supersoliconen is de modernste en relatief eenvoudige methode. Om de bloedgroep te bepalen, worden tsoliclones gebruikt, d.w.z. monoklonale antilichamen.

Wat is nodig om de bloedgroep en Rh-factor te bepalen?

- tsoliclon anti-A;

- tsoliclon anti-B;

- tsoliclon anti-D;

- natriumchloride-oplossing 0,9%; speciale tablet; steriele stokjes.

Algoritme en procedure voor het bepalen van de bloedgroep

Breng tsoliklones anti-A, anti-B aan op een speciale tablet, één grote druppel (0,1 ml), onder de juiste labels.

Druppel ernaast het testbloed (0,01–0,03 ml), één druppel tegelijk. Roer ze en observeer het begin of de afwezigheid van een agglutinatiereactie gedurende 3 minuten. Als het resultaat twijfelachtig is, voeg dan 1 druppel 0,9% zoutoplossing toe.

Het ontcijferen van de resultaten van het bepalen van de bloedgroep

• als de agglutinatiereactie optrad met anti-A-tsoliclone, dan behoort het onderzochte bloed tot groep A (II);
• als de agglutinatiereactie optrad met anti-B-tsoliclone, dan behoort het testbloed tot groep B (III);
• als de agglutinatiereactie niet optrad met anti-A- en anti-B-tsoliconen, dan behoort het onderzochte bloed tot groep 0 (I);
• als de agglutinatiereactie optrad met anti-A- en anti-B-tsoliclonen, dan behoort het onderzochte bloed tot de AB (IV) -groep, zoals weergegeven in de figuur.

Bepaling van de Rh-factor door zoliclone Anti-D

Een grote druppel (0,1 ml) anti-D zoliclon en een kleine druppel (0,01 ml) van het te onderzoeken bloed van de patiënt worden op de plaat gemengd. Het begin van de agglutinatiereactie of de afwezigheid ervan wordt gedurende 3 minuten waargenomen.

• als de agglutinatiereactie optrad met anti-D-tsoliclone, dan is het geteste bloed Rh-positief (Rh +)
• als de agglutinatiereactie niet optrad met anti-D-tsoliclone, dan is het testbloed Rh-negatief (Rh -)

Met andere woorden, bij het mengen van tsoliklon Anti-D met Rh-positieve erytrocyten treedt een agglutinatiereactie op en als het bloed Rh-negatief is, is er geen agglutinatie (zoals weergegeven in de afbeelding - de vierde bloedgroep is Rh-negatief).

Bepaling van bloedgroepen met standaard sera

Bepaling van bloedgroepen door standaard isohemagglutinerende sera - zoeken en detecteren van antigenen A en B in het bloed met behulp van de agglutinatiereactie. Gebruik om het doel te bereiken:

• Standaard isohemagglutinerende sera van bloedgroepen O (I) - kleurloos, A (II) - blauw, B (III) - rood, AB (IV) - geel.
• Witte platen gemerkt met bloedgroepen: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
• NaCl 0,9%
• Glazen stokjes

Methode voor het bepalen van de bloedgroep met standaardsera

Methode voor het bepalen van de bloedgroep met standaardsera

1. Onderteken de plaat (naam van de patiënt);
2. Pas aanduidingen toe van twee series standaardsera van I, II en III bloedgroepen in een volume van 0,1 ml, en vorm twee rijen van drie druppels van links naar rechts: 0 (I), A (II), B (III);
3. Bloed uit een ader halen. Breng zes druppels van het te onderzoeken bloed van de patiënt met een glazen staafje over op een plaat op zes punten naast een druppel standaardserum en meng.

Agglutinatie begint na 30 seconden. Voeg in die druppels waar agglutinatie heeft plaatsgevonden een druppel NaCl 0,9% toe en beoordeel het resultaat.

Evaluatie van de resultaten van de bloedgroepbepaling met standaardsera

Een positieve agglutinatiereactie kan zandig of bloemblad zijn. Bij een negatieve reactie blijft de druppel uniform rood gekleurd. De resultaten van de reacties in druppels met sera van dezelfde groep (twee reeksen) moeten samenvallen. Het behoren van het onderzochte bloed tot de overeenkomstige groep wordt bepaald door de aan- of afwezigheid van agglutinatie bij reactie met de overeenkomstige sera na observatie gedurende 5 minuten. Opgemerkt moet worden dat als de sera van alle drie de groepen een positieve reactie gaven, dit erop wijst dat het testbloed zowel agglutinogenen (A en B) bevat als tot groep AB (IV) behoort. Om een ​​niet-specifieke agglutinatiereactie uit te sluiten, is het in dergelijke gevallen echter noodzakelijk om een ​​aanvullend controlestudie van het testbloed uit te voeren met standaard isohemagglutinerend serum van groep AB (IV), dat geen agglutinines bevat. Alleen de afwezigheid van agglutinatie in deze daling in de aanwezigheid van agglutinatie in druppels die standaardsera van groepen 0 (I), A (II) en B (III) bevatten, stelt ons in staat de reactie als specifiek te beschouwen en het onderzochte bloed door te verwijzen naar groep AB (IV).

Bepaling van de bloedgroep

Crossbloedgroepbepaling - detectie van de aan- of afwezigheid van antigenen A en B in het onderzochte bloed met behulp van standaard isohemagglutinerende sera, evenals antilichamen α en β met standaard erytrocyten. De reactie met standaard sera wordt uitgevoerd zoals hierboven beschreven..

Kruismethode voor bloedgroepbepaling

Reactie met standaard erytrocyten

Om te reageren met standaard erytrocyten zijn standaard erytrocyten van drie bloedgroepen vereist: 0 (I), A (II), B (III).

Procedure voor de reactie met standaard erytrocyten

1. Bloed voor onderzoek wordt uit een ader in een reageerbuis genomen, gecentrifugeerd of gedurende 30 minuten bewaard om serum te verkrijgen.
2. Drie grote druppels (0,1 ml) bloedserum uit een reageerbuis worden op een gemarkeerde plaat aangebracht en daarnaast een kleine druppel (0,01 ml) standaard erytrocyten van groepen.
3. De overeenkomstige druppels worden gemengd met glazen staafjes, de plaat wordt geschud, 5 minuten geobserveerd, NaCl 0,9% wordt met agglutinatie aan de druppels toegevoegd en het resultaat wordt geëvalueerd.

Evaluatie van de resultaten van de reactie met standaard erytrocyten

Evalueer de resultaten die zijn verkregen met standaard isohemagglutinerende sera en standaard erytrocyten. De eigenaardigheid van de resultaten van de reactie met standaard erytrocyten - erytrocyten van groep 0 (I) worden als controle beschouwd. Het resultaat van de kruismethode wordt als betrouwbaar beschouwd als bij reactie met standaard isohemagglutinerende sera en met standaard erytrocyten de antwoorden over de onderzochte bloedgroep samenvallen. Als dit niet gebeurt, moeten beide reacties opnieuw worden uitgevoerd.

Bepaling van de bloedgroep

In 1901 ontdekte de eminente wetenschapper Karl Landsteiner bloedgroepen en legde hij de basis voor de moderne transfusiologie. De onderzoeker identificeerde drie groepen op basis van verschillende varianten van de agglutinatiereactie van erytrocyten en bloedserum. Het materiaal voor het onderzoek is afkomstig van medewerkers van ons eigen laboratorium. Landsteiner's studenten Decastello en Sturley ontdekten de vierde groep een paar jaar later, maar ze vonden het twijfelachtig en uitgesloten van de onderzoeksresultaten. In 1906 bevestigde een Praagse psychiater Jan Janski het bestaan ​​van de AB (IV) -groep. De publicatie van het onderzoek in een lokale publicatie bleef bijna onopgemerkt. In 1910, na de herontdekking van de vierde groep door Moss, moest Jan Jansky de superioriteit van de ontdekking bewijzen. Een Tsjechische wetenschapper stelde een digitale aanduiding van bloedgroepen voor: I, II, III, IV.

In de transfusiegeneeskunde worden verschillende combinaties van erytrocytenantigenen bloedgroepen genoemd. Antigenen zijn genetische eigenschappen: ze worden overgeërfd van ouders en blijven gedurende het hele leven onveranderd. In 1980 ontwikkelde de International Blood Transfusion Community een numerieke terminologie voor rode bloedcelantigenen. 23 bloedgroepsystemen toegewezen, waaronder 194 antigenen. De nummering komt in de meeste gevallen overeen met de volgorde van detectie. De antigenen in elk van de 23 systemen zijn gecodeerd met een zescijferig nummer: de eerste drie cijfers zijn het systeemnummer, de overige drie geven de specificiteit van het antigeen in het systeem aan.

AB0 bloedgroepsysteem

Groepsverband volgens het AB0-systeem

• 0 (I): antigenen A en B ontbreken, antilichamen α en β worden gedetecteerd (35 - 40% van de wereldbevolking);
• A (II): antigeen A en antilichamen β zijn aanwezig (35%);
• B (III): Agglutinogeen B en Agglutinine a werden gevonden (15 - 20%);
• AB (IV): aanwezigheid van agglutinogenen A en B, afwezigheid van agglutinines α en β (5-10%).

Als u van west naar oost van Eurazië beweegt, neemt de detectiesnelheid van antigeen A af en neemt antigeen B toe. Antigeen 0 is zeldzaam in Azië, maar is wijdverbreid onder de inheemse volkeren van Zuid-Amerika, Polynesië en Australië. De reden is epidemieën van infectieziekten.

Het resultaat van de bloedtypering wordt vastgelegd in de medische geschiedenis of op de donorkaart. De transfusiedokter geeft de datum en tekens aan.

In sommige gevallen wordt tijdens het typen een milde agglutinatie van erytrocyten waargenomen. De onvoldoende uitgesproken reactie wordt verklaard door de aanwezigheid van zwakke varianten van antigenen A en B. De grootste klinische significantie wordt gepresenteerd door subgroepen A₁ en een₂. Zwakke varianten werden voor het eerst ontdekt in 1911 door wetenschappers Dungern en Hirszeld. Later in 1930 stelden Landsteiner en Levine de subgroepnamen voor - A₁ en een_2. EEN₂ komt voor tot 20% in groep A en tot 35% in groep AB. Gezichtsserum van bloedmonsters A₂ kan anti-A bevatten₁-antilichamen: in 2% van de gevallen in groep A₂ en 30% in A₂B. Anti-A-antilichamen₁ zijn gevaarlijk vanwege agglutinatie van erytrocyten van groep A.

Methode voor het bepalen van bloedgroepen A₂ en een₂B.

Detectiepercentage van erytrocyten A₂ varieert aanzienlijk, afhankelijk van de gebruikte reagentia. Hier is een vergelijking van de onderzoeksresultaten bij gebruik van verschillende methoden voor het bepalen van bloedgroepen A₂ en een₂B..

• Anti-A₁ (lectine, fytohemagglutinine). Diagnosticum duidelijk (op +++ / ++++) agglutinaten A₁ erytrocyten onmiddellijk na menging met het monster. Agglutineert niet A₂ of veroorzaakt kleine agglutinatie op de vijfde minuut of later.
• Standaard isohemagglutinerende serums.
• Anti-A- en anti-AB-cyclonen.
• Tsoliklon anti-A zwak.

Opmerking: * - agglutinatie is zwak, er zijn kleine agglutinaten op een roze achtergrond.

De hoogste onderzoeksnauwkeurigheid wordt geleverd door Anti-A₁ (lectine, fytohemagglutinine). De test wordt aanbevolen voor de detectie van antigeen A-subgroepen bij kinderen jonger dan twee jaar. De reden is de fysiologische onvolgroeidheid van erytrocyten van pasgeborenen, wat leidt tot foutieve resultaten van een onderzoek met standaard isohemagglutinerende sera..

In 1930 ontdekten Landsteiner en Levine het subtype Aint: een tussenvariant tussen A₁ en een₂. Dit antigeen is kenmerkend voor negroïden en bereikt 8,5% bij personen met bloedgroep A. Bij blanken werd Aint waargenomen bij slechts 1% van de mensen met de tweede bloedgroep. In uiterst zeldzame gevallen mist een persoon alle antigenen van het AB0-systeem. Het Bombay-fenotype is te wijten aan het hh-genotype. Bij afwezigheid van H-antigeen worden anti-A- en anti-B-antilichamen gevonden bij personen van deze categorie.

Methode voor het bepalen van bloedgroepen

Algoritme voor het bepalen van de bloedgroep met hemagglutinerende sera

Om de AB0-bloedgroep direct te bepalen, worden twee series standaard isohemagglutinerende sera gebruikt. Maak twee batches sera uit drie groepen met een titer van 1:32 of hoger. Gebruik een aparte gelabelde pipet om elk serum te trekken. Bereid AB (IV) serum voor ter controle.

1. Zorg voor een goede verlichting en een luchttemperatuur van 18 - 25 ° C.
2. Markeer de plaat: 0 (I) - links, A (II) - midden, B (III) - rechts. Geef bovenaan in het midden de naam van de donor of het nummer van het bloed dat wordt geanalyseerd op.
3. Breng 1-2 druppels (ongeveer 0,1 ml) serum aan in putjes in twee rijen volgens het plaatetiket.
4. Plaats een kleine druppel van de te onderzoeken erytrocyten naast de druppels serum met een pipet of glazen staafje. Het volume van het serum moet ongeveer 10 keer het volume van de erytrocytbevattende vloeistof zijn.
5. Roer de druppels in de putjes met een stok.
6. Schud de tablet licht om de reactie te versnellen.
7. Voeg na drie minuten een druppel NaCl toe aan de putjes van de plaat, waarin de agglutinatie is begonnen. Wacht nog twee minuten.
8. Evalueer na vijf minuten de reactieresultaten in de passerende set. Voeg bij milde agglutinatie nog een druppel NaCl toe.

• Een negatieve reactie in drie putjes duidt op de afwezigheid van antigenen op de erytrocyten van het testmonster. Bloed behoort tot groep 0 (I).
• Agglutinatie in putjes met serum 0 (I) en B (III) duidt op de aanwezigheid van agglutinogeen A en behorend tot groep A (II).
• Het begin van een reactie met sera 0 (I) en A (II) duidt op de aanwezigheid van antigeen B en groep B (III).
• De reactieresultaten in alle putjes duiden op de aanwezigheid van agglutinogenen A en B en komen overeen met de vierde groep AB (IV).

In het laatste geval moet u ervoor zorgen dat er geen niet-specifieke reactie is: breng 2 - 3 druppels van de overeenkomstige serumgroep AB (IV) aan op de plaat en voeg een druppel van de geanalyseerde erytrocyten toe. Roer de vloeistoffen om en beoordeel het resultaat na vijf minuten. De afwezigheid van agglutinatie geeft aan dat het tot de AB (IV) -groep behoort, de aanwezigheid is een teken van een niet-specifieke reactie. Herhaal in dit geval, evenals bij milde agglutinatie, de studie met andere series sera.

Techniek voor het bepalen van de bloedgroep met tsoliclones

Monoklonale antilichamen tegen erytrocytenantigenen hebben de isohemagglutinerende sera vervangen. Eén batch anti-A-, anti-B-, anti-AB-reagentia is voldoende voor elke typering. De introductie van monoklonale reagentia heeft de methode voor het bepalen van de AB0-bloedgroep aanzienlijk vereenvoudigd en gestandaardiseerd. Hier is een snelle stapsgewijze handleiding voor het uitvoeren van onderzoek op een tablet.

1. Zorg voor goede verlichting. Werk bij kamertemperatuur.
2. Het object van onderzoek zijn media die erytrocyten bevatten.
3. Label de putjes van de plaat: anti-A, anti-B, anti-AB of gebruik de plaat met een gelabelde sticker.
4. Doseer ongeveer 0,1 ml van het geschikte monoklonale reagens in elk van de drie gelabelde putjes.
5. Voeg ongeveer 0,03 ml geanalyseerde erytrocyten toe naast elke druppel diagnosticum.
6. Meng het reagens met de erytrocyten in de putjes met afzonderlijke afzonderlijke glazen staafjes.
7. Schud de tablet ongeveer drie minuten.
8. Controleer op agglutinatie in de putjes.

Meestal wordt een reactie al in de eerste seconden na het mengen gedetecteerd. Tegelijkertijd kunnen zwakke varianten van antigenen A en B een latere agglutinatie veroorzaken.

Bepaling van de bloedgroep door de indirecte methode: een algoritme van acties

De methode voor het bepalen van de bloedgroep is gebaseerd op de interactie van erytrocyten van vooraf getypeerde individuen van groepen 0, A, B of een mengsel van erytrocyten van verschillende donoren uit één groep met isohemagglutinines α en β in het bestudeerde serum.

Gebruik droge, schone pipetten bij elk typereagens. Spoel roerstaafjes en pipetten in 0,9% NaCl-oplossing.

• Maak een bord of bord klaar. Zorg voor een goede verlichting in de kamer.
• Verzamel 3-5 ml bloed zonder stabilisator in een reageerbuis. Laat de wei 1,5 - 2 uur op kamertemperatuur staan.
• Was testerytrocyten in 0,9% zoutoplossing. Bereid een suspensie van 5% voor.
• Markeer de secties op de tablet: 0 (I), A (II), B (III).
• Doseer 2 druppels (ongeveer 0,1 ml) van het geanalyseerde plasma in elk van de drie putjes.
• Voeg aan elk putje ongeveer 0,03 ml rode bloedcellen toe.
• Gebruik afzonderlijke stokjes om getypeerde rode bloedcellen met serum te mengen.
• Schud de tablet voorzichtig gedurende 5 minuten.
• Voer een visuele beoordeling uit van de resultaten van de agglutinatietest in doorvallend licht.

Conclusie over aansluiting bij een groep

+ - de aanwezigheid van agglutinatie, - - negatief resultaat van de reactie.

• 0 (I): reactie in putjes A (II), B (III) (antilichamen α en β gedetecteerd).
• A (II): agglutinatie met erytrocyten B (III) (β-agglutinines gedetecteerd).
• B (III): agglutinatie in gat A (II) (α-agglutinines bepaald).
• AB (IV): geen reactieresultaten in alle putjes (geen antilichamen gedetecteerd in plasma).

Rhesus-systeem

Levine en Stetson ontdekten Rhesus-antigenen in 1939. Wetenschappers hebben de oorzaken bestudeerd van de ontwikkeling van hemolytische reacties bij vrouwen tijdens de bevalling tijdens transfusies aan vrouwen die identiek zijn in de AB0-, MN- en P.-systemen van erytrocyten van echtgenoten. Een jaar later produceerden Landsteiner en Wiener antilichamen door konijnen te immuniseren met erytrocyten van resusapen. De antilichamen worden anti-RH-antilichamen genoemd. De resulterende agglutinines gingen in een agglutinatiereactie met erytrocyten van resusapen en met erytrocyten van 85% van de blanke New Yorkers. Het antigeen dat de vorming van antilichamen veroorzaakte, wordt de RH-factor (D-factor) genoemd.

In zeldzame gevallen bevatten menselijke rode bloedcellen geen resusantigeen. Het fenotype wordt Rh genoemd_nul. Gene Xr_O in dit geval wordt het gepresenteerd in een homozygote vorm en onderdrukt het de productie van alle antigenen. Rh-fenotype_nul vertonen geen agglutinogene activiteit, maar hebben het vermogen antigenen over te dragen door overerving.

Onder Europeanen is de frequentie van Rh-positief voor D-antigeen 85%. Het membraan van rode bloedcellen bevat gewoonlijk ongeveer 10.000 - 30.000 D-moleculen Er zijn twee speciale typen D-positieve personen: D u (zwak) en D partieel (gedeeltelijk). Het immuunsysteem D u en D partieel is in staat om anti-D-antilichamen te produceren.

Een zwak antigeen wordt gevonden bij 1,5% van Rh-positieve individuen en wordt gekenmerkt door een laag aantal (100-500) D-moleculen op het membraan. Het is immunogeen voor Rh-negatieve personen. In dit geval kan de transfusie van D-positieve erytrocyten aan patiënten met zwakke D sensibilisatie van de bloedcellen van de donor veroorzaken. Erytrocyten met Du zijn zwak geagglutineerd of gaan helemaal niet in een directe agglutinatiereactie met volledige anti-Rh-antilichamen. Bepaling van Rh-affiliatie wordt uitgevoerd in een indirecte antiglobulinetest. Dragers D u worden beschouwd als Rh-positieve donoren en Rh-negatieve ontvangers.

Gedeeltelijke D is deficiënt in een of meer epitopen van het eiwitmolecuul. Het immuunsysteem van mensen met partiële D kan antilichamen produceren tegen de ontbrekende epitopen. Er worden zeven groepen personen onderscheiden onder dragers van een gedeeltelijk antigeen. De grootste klinische betekenis is het vervoer van D VI (alleen epitoop Z is aanwezig): de eigenaren van deze categorie produceren antilichamen tegen het onveranderde antigeen en tegen de partiële antigenen D I - D V, D VII. De techniek voor het bepalen van de Rh-factor D VI bestaat uit het opeenvolgend gebruik van twee diagnostische middelen: monoklonale IgM anti-D-antilichamen (tsoliklone Anti-D-Super of Anti-D IgM) en polyklonale of monoklonale IgG anti-D-antilichamen (standaard universeel reagens of tsoliklon Anti-D -D). Een negatief resultaat van de reactie bij de eerste en een positief resultaat in de tweede fase van het onderzoek duidt op de detectie van D VI. Categorie D VI komt typisch overeen met het genotype CcDee. Zwangere vrouwen met D VI krijgen bij het dragen van een foetus met volledige D een anti-resus immunoglobuline voorgeschreven.

Antilichamen tegen Rhesus-antigenen zijn immuun. Sta op als gevolg van isosensibilisatie. De specificiteit wordt bepaald door de antigenen die de vorming van antilichamen veroorzaken. Isoleer complete en onvolledige antilichamen.

Compleet zijn IgM-antilichamen. Ze hebben een hoog molecuulgewicht en worden minder vaak aangetroffen dan onvolledige antilichamen. In staat om Rh-positieve erytrocyten te agglutineren. Zijn minder belangrijk voor transfusies.

Onvolledig behoren overwegend tot de IgG-klasse. Ze worden op het oppervlak van Rh-positieve erytrocyten gefixeerd zonder de vorming van agglutinaten. Het binden van bloedcellen wordt uitgevoerd in aanwezigheid van colloïdale oplossingen en proteolytische enzymen of na behandeling met antiglobulineserum. Ze hebben een lager molecuulgewicht in vergelijking met volledige antilichamen. In staat om de placenta te passeren. Tijdens sensibilisatie worden eerst volledige antilichamen geproduceerd en vervolgens in grotere mate onvolledige (IgG-immunoglobulinen) antilichamen.

Techniek voor het bepalen van de Rh-factor met behulp van de Anti-D-Super tsoliklon

Tsoliklon Anti-D-Super is een volledig menselijk anti-D IgM-antilichaam. Om betrouwbare resultaten te verkrijgen, moet het geanalyseerde monster een voldoende aantal rode bloedcellen bevatten..

1. Zorg voor een goede verlichting en kamertemperatuur in de kamer.
2. Plaats een grote druppel (ongeveer 0,1 ml) anti-D IgM op de plaat.
3. Plaats een kleine druppel (ongeveer 0,03 ml) van de test rode bloedcellen in de buurt.
4. Meng twee druppels met een steriel stokje.
5. Schud de plaat na 10 - 15 seconden voorzichtig gedurende 20 - 30 seconden.
6. Controleer drie minuten na het mengen op agglutinatie.

Bij een reactie wordt het bloed beoordeeld als Rh-positief (Rh +), bij afwezigheid van een reactie - als Rh-negatief (Rh-). In het geval van negatieve of zwakke agglutinatie, is het noodzakelijk om het onderzoek opnieuw uit te voeren met onvolledige anti-D IgG-antilichamen om een ​​zwak of gedeeltelijk antigeen D te identificeren..

Methode voor het bepalen van de Rh-factor D u in een reageerbuisproef

Parallel aan de analyse worden drie controlemonsters uitgevoerd: het anti-D (anti-D IgG) tsoliklon-reagens met standaard Rh-positieve en Rh-negatieve erytrocyten, de geanalyseerde erytrocyten met een gelatine-oplossing zonder anti-D IgG-diagnostiek.

1. Plaats in een reageerbuis 0,05 - 0,1 ml (één druppel) erytrocyten van een gestold bloedstolsel of gewassen met een conserveermiddel.
2. Voeg 0,1 ml (twee druppels) 10% gelatine toe, opgewarmd tot liquefactie bij 45-50 ° C.
3. Voeg een druppel Anti-D (anti-D IgG) tsoliclon toe.
4. Mengen.
5. Incubeer de buis 10-15 minuten in een waterbad of een half uur in een incubator bij 48 ° C.
6. Voeg 5 - 6 ml isotone oplossing toe.
7. Keer de buis 1 - 2 keer om.
8. Beoordeel de aanwezigheid van agglutinatie in doorvallend licht.

Het ontbreken van resultaten van de reactie met anti-D IgM en uitgesproken agglutinatie met anti-D IgG duiden op de detectie van zwakke vormen van antigeen D. In geval van milde agglutinatie moet het onderzoek worden herhaald in de indirecte Coombs-test.

Bepaling van Rh-aansluiting met een standaard universeel reagens

Standaard reagens antiresus Rh₀D bevat polyklonale onvolledige anti-D-antilichamen. Parallel met de analyse van het monster wordt een controlestudie van het Rh-reagens uitgevoerd₀D met standaard Rh-positieve (enkele groep of groep 0) en Rh-negatieve (enkele groep) erytrocyten.

1. Plaats een druppel Rh diagnosticum op de bodem van de buis₀D.
2. Voeg een druppel geanalyseerde rode bloedcellen toe.
3. Schud de tube meerdere keren.
4. Kantel de buis tot bijna horizontaal en draai langzaam gedurende minstens 3 minuten. Door de inhoud langs de muren te verspreiden, krijg je een meer uitgesproken reactieresultaat. Gewoonlijk vindt agglutinatie plaats in de eerste 60 seconden. Er is tijd nodig om een ​​zwak antigeen D u te detecteren.
5. Voeg 2 - 3 ml isotone NaCl-oplossing toe en keer de buis 2 - 3 keer om zonder te schudden.
6. Beoordeel visueel de aanwezigheid van agglutinatie. Uitgesproken vlokken tegen de achtergrond van een heldere oplossing duiden op de aanwezigheid van antigeen D.Een uniform gekleurde vloeistof duidt op de afwezigheid van antigeen.

Het resultaat wordt pas als betrouwbaar beschouwd na controle van de controlemonsters: het begin van een reactie met standaard Rh-positief en geen reactie - met Rh-negatieve erytrocyten.

Voor informatie over de stapsgewijze formulering van de indirecte Coombs-test met onvolledige anti-D-antilichamen, zie het gedeelte van de website "Coombs-reactie".